Le test est basé sur le principe d’un test ELISA sandwich pour mesurer la concentration de hPG80 dans les échantillons de plasma qui ont été prélevés dans des tubes EDTA.

En bref, un anticorps de capture spécifique de la hPG80 est immobilisé sur une plaque de 96 puits. La hPG80 présente dans les calibrateurs et les échantillons ajoutés aux puits se lie à l’anticorps de capture immobilisé. La plaque de test comprend des calibrateurs qui sont utilisés pour estimer le niveau de hPG80 dans les échantillons de plasma EDTA. Les puits sont lavés et un anticorps de détection anti-hPG80 couplé à la peroxydase de raifort (HRP) est ajouté, ce qui donne un complexe anticorps-antigène-anticorps. Après un second lavage, une solution de substrat de 3,3’,5,5’-Tétraméthylbenzidine (TMB) est ajoutée aux puits, produisant une couleur bleue directement proportionnelle à la quantité de hPG80 présente dans l’échantillon initial. La solution d’arrêt change la couleur du bleu au jaune, et les puits sont lus à 450 nm avec un lecteur de microplaques.  

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Le test  est techniquement caractérisé en manuel par une limite de détection (LoD, 1.0 pM) et une limite de quantification (LoQ, 3.3 pM). La LoD détecte la présence de hPG80 et la LoQ donne la concentration à partir de laquelle le dosage est quantitatif.